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AAV能实现基因更快地表达,你知道吗?

 

一、AAV简述

腺相关病毒(AAV)属微小病毒科依赖病毒属,是一种线性无包膜的单链DNA病毒,基因组大小4.7kb左右,直径在20-26nm的正二十面体。重组腺相关病毒(rAAV)作为目前广泛使用的基因转导及基因治疗的工具,能将外源基因转导到分裂细胞及终末分化的细胞中,并维持基因的相对长效表达。重组腺相关病毒(rAAV)由于其安全性、低免疫原性、无致病性等特点受到人们的青睐,且已被广泛用作体内研究和基因治疗的理想载体。

 

二、双链AAV(ScAAV)优势

腺相关病毒为单链DNA病毒(ssAAV), 必须首先完成单链基因组向有转录活性的双链形式的转变,然后才能开始表达,这一过程限制了AAV载体介导的基因转导,并直接影响病毒的感染效率。自身互补双链 DNA 的腺相关病毒( sc AAV)能够克服这一限制,不需要经历一个由单链变为双链的过程,也就是说,双链AAV病毒进入细胞后,可以直接表达,并且表达时间更快,表达水平更高。

 

三、维真scAAV质粒系统

维真生物现推出scAAV质粒系统,能够更快更强的实现目的基因的表达,并能够提供多种血清型的AAV病毒供客户选择。

 

 

 

对照质粒

 

外源基因质粒

 

 

 

 

 

scAAV产品特点:

① 相比ssAAV,ScAAV的基因转导效率更强;

② 更适于要求目的基因更快表达,或者基因更强表达的研究;

③ 包装容量相比ssAAV要小,只有其一半的包装容量;

④ 可包装AAV1/2/5/6/7/8/9/retro/php.B/PHP.eB/Anc80等十余种血清型;

 

 

 

附:文献分享:

Self-Complementary Adeno-Associated Virus Vectors Improve Transduction Efficiency of Corneal Endothelial Cells.


研究内容在CEC基因治疗中,ssAAV2与ScAAV2的转导效率的比较;

研究方法:通过体内外实验探究二者在基因转导效率上的差异;


研究结果:

1、不同剂量的ssAAV2与ScAAV2,分别感染HCEC-12细胞,流式细胞术检测,结果显示ScAAV2组中GFP的表达要明显多于ssAAV2组;



图1. 流式细胞术检测HCEC-12 细胞中GFP表达

 


2、不同剂量的ssAAV2与ScAAV2,分别感染HCEC-12细胞,激光共聚焦检测得到的结果与上述结果一致;



图2. 激光共聚焦检测ssAAV2与ScAAV2感染的HCEC-12细胞中GFP表达

 


3、将ssAAV2与ScAAV2分别感染人供体角膜,激光共聚焦结果显示ScAAV2组中GFP的表达要明显多于ssAAV2组。

 


图3. 激光共聚焦检测人供体角膜中GFP的表达

  

 

 

以上实验结果表明:无论是在人角膜内皮细胞,还是人供体角膜中,ScAAV的基因转导效率都要明显高于ssAAV,这一结果将对AAV载体在CEC基因治疗中更好的应用提供数据支持。

  

 

 




        

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